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ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠和western處理樣本的區(qū)別
更新時(shí)間:2018-05-31   點(diǎn)擊次數(shù):991次

根據(jù)ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠實(shí)驗(yàn)分析,將western和Elisa處理樣本卻別比對(duì)出來(lái),分析給客戶(hù)。

Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液,然后冰上研磨,收集于EP管,冰上裂解30min,4度12000rpm離心15min,取上清分裝,即得到蛋白樣品。建議直接電泳,多余的-80保存。建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量,一次性用完一支,避免反復(fù)凍融。

ELISA樣品,直接腦組織冰上勻漿,收集于EP管,同上一樣離心,大約220-250ul每支分裝(因?yàn)镋LISA上樣量基本都是每孔100ul,做復(fù)孔,每個(gè)樣品2孔,就需要200ul,為了避免不夠2孔,分裝時(shí)要大于200ul每支),直接實(shí)驗(yàn)。多余的-80保存,一樣避免反復(fù)凍融。

不過(guò)ELISA少量樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),或者查閱文獻(xiàn),看看大概組織里有多高濃度,選擇合適的試劑盒,測(cè)量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過(guò)高測(cè)量不準(zhǔn),或者濃度過(guò)低,小于試劑盒zui低可測(cè)濃度。
對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無(wú)色。有些供氫體有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿(mǎn)意的供氫體。ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。

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英文名稱(chēng) 規(guī)格: 48T/96T 筑絲蛋白5(TEKT5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) Homo sapiens (Human)
ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠

 

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