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按照ELISA試劑盒說明書要求用途
更新時間:2015-04-10   點擊次數(shù):735次

按照ELISA試劑盒說明書要求用途

2.陰性對照:

     (1)陰性對照的含義與要求:ELISA試劑盒所謂陰性對照,是本次檢測試驗中采用與待檢測物(樣品、人用試劑就是人的血清等)具有同源性和同質性,又不含有待檢物質,并且能夠客觀比較和鑒別處理因素(血清免疫學試驗中有特異性抗原與抗體反應)之間的差異。因此,用動物血清或其制品代替陰性人血清作為對照品,無論是從理論還是實踐上都是不可取的。注意:據(jù)我所知,國產(chǎn)ELISA試劑盒中,有的是用動物血清制品稀釋配置或與部分人血清混合配置的;陰性對照讀數(shù),并不是“越低越好"。NCx值接近0.00X水平,這是假象!試想一下,真正采用“陰性人血清"的陰性對照品,NCx值會如此之低嗎?例如,雅培乙肝六項ELISA試劑盒的NCx值,分別為:0.010(HBsAg)、0.027(抗—HBs)、0.035(HBeAg)、1.083(抗—HBe)、1.065(抗—HBc)、0.045(抗HBc-IgM)。生物梅里埃的HIV試劑NCx是0.091。辨別試劑NCx值是否合理的一個很簡單的方法,只要對比大量陰性樣本的實際讀數(shù)就“一目了然"啦!
(2)陰性對照分為兩類

     一是受檢人血清中并不含有或方法學靈敏度未能檢出的待檢物的基準水平,并且結果判斷值(Cut off)計算式中決定“是"(陽性)、或“否"(陰性)的*可變值。陰性對照值高,導致假陰性;反之,ELISA試劑盒導致假陽性。二是陰性對照設置,在方法學上要求加入指示性定量標準品,ELISA試劑盒如中和劑HBeAg,定量HBcAg等,用以檢測抗—HBe、抗—HBc?;蛘?,選取代表平均水平的正常人血清用作陰性對照,ELISA試劑盒如檢測抗—HBc IgM。此類Cut off 值計算時,多數(shù)均包括陰性和陽性對照值2個可變值。

 

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